LungMe肺癌基因甲基化检测采集注意

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适用样本类型纤支镜下细胞学样本：首选肿瘤部位刷检液，次选对准肿瘤部位的冲洗液（特别是活检后），后选肺泡灌洗液1.肿瘤部位刷检液：可刷检到病灶时，刷检液是最佳样本，灵敏度最高2.对准肿瘤部位的冲洗液：活检前后皆可，对准肿瘤部位冲洗，该冲洗液灵敏度高注：刷检液、冲洗液二者可以合并为一份样本进行甲基化检测3.肺泡灌洗液：结节生长在周边，无法做到刷检、甚至无法做到对准肿瘤部位冲洗时，也请尽量做到亚段灌洗。肺泡灌洗液的灵敏度不如刷检液、冲洗液（收集到的肿瘤细胞数量少，且比例也低）纤支镜活检组织样本（临床高度怀疑肺癌、但活检阴性，应做甲基化复查）经皮穿刺活检组织样本（临床高度怀疑肺癌、但活检阴性，应做甲基化复查）胸水（做甲基化可以及时确诊或排除肿瘤）手术后活检组织样本痰液：用于Lung-Me检测的痰液样本≥10ml，保存于50mL采样管（内含20ml保存液）。注：组织样本：新鲜组织、冰冻组织、石蜡包埋组织皆可做采样方式刷检液：将50ml管（锥形底，如下图）预装5ml生理盐水或细胞保存液。用力将刷检后的毛刷在生理盐水或细胞保存液中震摇，以涮脱毛刷上的细胞。冲洗液：活检前后皆可，对准肿瘤部位冲洗，收集该冲洗液。（按医院纤支镜常规操作即可）注：刷检液、冲洗液二者可以合并为一份样本进行甲基化检测肺泡灌洗液：结节生长在周边，无法做到刷检、甚至无法做到对准肿瘤部位冲洗时，也请尽量做到亚段灌洗。（按医院纤支镜常规操作即可）胸水：按医院常规操作即可。样本总量的1/3做甲基化（最多ml，至少5-10ml）。注：对于细胞学液体样本，如同一瓶样本还要做液基细胞学检查，请采样后将样本混匀，然后立即进行分样：5-10ml做甲基化检测，剩余样本做细胞学检查。如是胸水，则1/3体积样本做甲基化检测（但至少要有5-10ml，最多ml），剩余胸水做细胞学检查。活检组织：按医院常规操作即可。石蜡包埋组织：按医院常规操作即可。样本量细胞学液体样本：至少5-10ml1.在刚开展本项目初期的磨合阶段，建议采样量达到10ml2.对于细胞学液体样本，如同一瓶样本还要做液基细胞学检查，请采样后将样本混匀，然后立即进行分样：5-10ml做甲基化检测，剩余样本做细胞学检查。如是胸水，则1/3体积样本做甲基化检测（但至少要有5-10ml，最多ml），剩余胸水做细胞学检查。新鲜组织、冰冻组织：2粒豌豆大小石蜡包埋组织：大拇指指甲盖大小，5-10μm厚，2片痰液样本：样本量≥10ml,详见下图说明样本保存1.保存期24小时以内：不做任何处理，4℃保存2.保存2-4天：a)无离心机的情况：加入2倍体积的细胞保存液，15-30℃保存b)有离心机的情况：将样本倒入15ml离心管（锥形底），r/min离心5min，弃去上清液（上清不用弃太净，防止倒掉细胞），加入一管细胞保存液（2.5ml），15-30℃保存。

新鲜组织、冰冻组织：新鲜穿刺组织可直接放在细胞保存液中，一般常温就是２～３天，到实验室-20保存，一周内做实验，离心后保存时间更久。

石蜡包埋组织：大拇指指甲盖大小，5-10μm厚，2片。刮下来放在1.5mlEP管里，封口。常温即可长期保存。痰液处理方式：采集的痰液标本，请尽快提取DNA；如不能立即提取，进行充分震荡混匀，并保存于冰箱（4℃一周，-20℃6个月），减少标本反复冻融，反复冻融5次内有效。胸水、腹水所需的样本量、处理方法、保存时间同肺泡灌洗液。

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